胞磷胆碱钠的制备

　　胞磷胆碱钠是神经保护剂，是磷脂酰胆碱内源性合成的中间体，也是卵磷脂生物合成必需的辅酶。作为临床常用的神经激活剂，胞磷胆碱钠是一种核苷衍生物。又名胞苷二磷酸胆碱钠，化学名称为胆碱胞嘧啶核苷二磷酸单钠盐。

　　准备

　　关于胞磷胆碱钠的制备方法有很多报导，但大致可以归纳为三种方式。一个是有机化学合成。该方法存在产品与缩合剂分离困难、不适用于医药、反应转化率低、副产物多、成本高、环境污染严重等问题。一种是微生物发酵，存在产品浓度低、产量不稳定等一些问题，另一种是酶法合成，如啤酒酵母泥等微生物生物合成。利用游离啤酒酵母泥细胞进行酶促合成具有工艺简单、转化率高、成本低的优点。酶法合成胞磷胆碱钠的过程可分为酶法合成和提取纯化两部分。本文采用正交设计研究了酶促合成过程中反应液组成的合理条件，即优化了反应液中胞苷、磷酸胆碱、葡萄糖、速冻啤酒酵母膏和硫酸镁的添加量，并找到了反应底物的合理配比。

　　实验法

　　啤酒醪酶法合成胞磷胆碱钠的原理是由微生物细胞提供的酶催化胞苷和磷酸胆碱合成胞苷二磷酸胆碱。利用国内啤酒生产中的废啤酒酵母泥。

　　将适量胞苷、磷酸胆碱和葡萄糖置于锥形瓶中，加入纯化水，搅拌溶解，然后加入速冻啤酒酵母泥，搅拌均匀，升温至29℃。加入一定量的硫酸镁，搅拌均匀，开始计时。维持反应温度在30±1℃左右，反应2小时后取样，测定转化率，加入葡萄糖补充代谢过程中消耗的能量物质。加入葡萄糖后，搅拌均匀。反应后，每1.5小时加入一次葡萄糖。反应8小时后，取样并测量转化率。反应过后。加热至70±2℃10分钟，然后迅速冷却至室温。反应液经板框压滤得到滤液，滤渣干燥后可作为饲料使用。以胞苷转化率计算酶法合成胞磷胆碱钠的产率，在30±1℃下反应时间约为8h。琼脂糖电泳和紫外分光光度法测定转化率三次。