胞磷胆碱钠的分析

　　方法名称:胞磷胆碱钠-液相色谱法测定

　　应用:本方法采用液相色谱法测定胞磷胆碱钠(C14h25n4Nao11p2 H2O)的含量。

　　该方法适用于胞磷胆碱钠。

　　原理:将供试品制成水溶液，用液相色谱仪分离。用紫外吸收检测器在276nm波长处检测胞磷胆碱钠的吸收值，计算其含量。

　　试剂:1.甲醇

　　2.磷酸缓冲液

　　3.四丁基磷酸铵溶液

　　仪器:1.工具

　　1.1液相色谱仪

　　1.2色谱柱

　　十八烷基硅烷键合硅胶作为填料

　　1.3紫外线吸收检测器

　　2.色谱条件

　　2.1流动相:磷酸盐缓冲液甲醇= 95 5.

　　2.2检测波长:276纳米

　　2.3柱温:室温

　　样品准备:1.磷酸缓冲液

　　将0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和磷酸四丁基铵溶液等量混合。

　　2.四丁基磷酸铵溶液

　　取0.01摩尔/升的四丁基氢氧化铵溶液，用磷酸调节pH值至4.5.

　　3.称量样品。

　　准确称取适量本品。

　　4.参考溶液的制备

　　准确称取5'-胞苷适量，加水配成每1mL含0.25mg的溶液，取上述溶液适量，与胞磷胆碱钠对照品等量混合。摇匀。

　　5.测试溶液的制备

　　将试样溶于水中，制成每毫升含0.25毫克的溶液，摇匀。

　　注:“精确称量”是指称量应精确到所称重量的千分之一。“精密测量”是指体积测量的准确度应满足国家标准中体积移液器的准确度要求。

　　操作步骤:准确吸取上述对照溶液10 μ l和供试品溶液10μL于液相色谱仪中，用紫外吸收检测器在波长276nm处测定胞磷胆碱钠的吸收值，计算其含量。