胞磷胆碱钠的分析
2022-08-15
方法名称:胞磷胆碱钠-液相色谱法测定
应用:本方法采用液相色谱法测定胞磷胆碱钠(C14h25n4Nao11p2 H2O)的含量。
该方法适用于胞磷胆碱钠。
原理:将供试品制成水溶液,用液相色谱仪分离。用紫外吸收检测器在276nm波长处检测胞磷胆碱钠的吸收值,计算其含量。
试剂:1.甲醇
2.磷酸缓冲液
3.四丁基磷酸铵溶液
仪器:1.工具
1.1液相色谱仪
1.2色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶作为填料
1.3紫外线吸收检测器
2.色谱条件
2.1流动相:磷酸盐缓冲液甲醇= 95 5.
2.2检测波长:276纳米
2.3柱温:室温
样品准备:1.磷酸缓冲液
将0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和磷酸四丁基铵溶液等量混合。
2.四丁基磷酸铵溶液
取0.01摩尔/升的四丁基氢氧化铵溶液,用磷酸调节pH值至4.5.
3.称量样品。
准确称取适量本品。
4.参考溶液的制备
准确称取5'-胞苷适量,加水配成每1mL含0.25mg的溶液,取上述溶液适量,与胞磷胆碱钠对照品等量混合。摇匀。
5.测试溶液的制备
将试样溶于水中,制成每毫升含0.25毫克的溶液,摇匀。
注:“精确称量”是指称量应精确到所称重量的千分之一。“精密测量”是指体积测量的准确度应满足国家标准中体积移液器的准确度要求。
操作步骤:准确吸取上述对照溶液10 μ l和供试品溶液10μL于液相色谱仪中,用紫外吸收检测器在波长276nm处测定胞磷胆碱钠的吸收值,计算其含量。