胞磷胆碱钠分析

2021-09-09

  方法名称:胞磷胆碱钠的测定——液相色谱法

  应用范围:本方法采用液相色谱法测定胞磷胆碱钠(C14H25N4NaO11P2·H2O)的含量。

  该方法适用于胞磷胆碱钠

  方法原理:将供试品制成水溶液,进入液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器在276nm波长处检测胞磷胆碱钠吸收值,计算其含量。

  试剂:1.甲醇

  2. 磷酸盐缓冲液

  3. 四丁基磷酸铵溶液

  仪器:1.仪器

  1.1 液相色谱仪

  1.2 色谱柱

  十八烷基硅烷键合硅胶 凝胶作为填充

  1.3 紫外吸收检测器

  2.色谱条件

  2.1 流动相:磷酸盐缓冲液甲醇 = 95 5.

  2.2 检测波长:276nm

  2.3 柱温:室温

  样品制备:1.磷酸盐缓冲液

  0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和磷酸四丁铵溶液等量混合。

  2.磷酸四丁铵溶液

  取0.01mol/L氢氧化四丁铵溶液,用磷酸调pH至4.5.

  3.称取供试品

  精确称取适量本品。

  4.对照品溶液的制备

  准确称取适量的5'-胞苷酸,加水配成每1mL含0.25mg的溶液,取上述溶液适量,混匀与胞磷胆碱钠参比物质相同的量。 摇匀即可。

  5. 供试品溶液的制备

  将供试品溶于水后,配成每1mL含0.25mg的溶液,摇匀,即得。

  注:“精密称量”是指称量应精确到所取重量的千分之一。“精密测量”是指测量体积的准确度应满足国家标准中体积移液器的准确度要求。

  操作步骤:分别精确吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μL到液相色谱仪中,用紫外吸收检测器在276nm波长处测定胞磷胆碱钠的吸收值,计算其含量。