胞磷胆碱钠分析
2021-09-09
方法名称:胞磷胆碱钠的测定——液相色谱法
应用范围:本方法采用液相色谱法测定胞磷胆碱钠(C14H25N4NaO11P2·H2O)的含量。
该方法适用于胞磷胆碱钠。
方法原理:将供试品制成水溶液,进入液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器在276nm波长处检测胞磷胆碱钠吸收值,计算其含量。
试剂:1.甲醇
2. 磷酸盐缓冲液
3. 四丁基磷酸铵溶液
仪器:1.仪器
1.1 液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶 凝胶作为填充
1.3 紫外吸收检测器
2.色谱条件
2.1 流动相:磷酸盐缓冲液甲醇 = 95 5.
2.2 检测波长:276nm
2.3 柱温:室温
样品制备:1.磷酸盐缓冲液
0.1mol/L磷酸二氢钾溶液和磷酸四丁铵溶液等量混合。
2.磷酸四丁铵溶液
取0.01mol/L氢氧化四丁铵溶液,用磷酸调pH至4.5.
3.称取供试品
精确称取适量本品。
4.对照品溶液的制备
准确称取适量的5'-胞苷酸,加水配成每1mL含0.25mg的溶液,取上述溶液适量,混匀与胞磷胆碱钠参比物质相同的量。 摇匀即可。
5. 供试品溶液的制备
将供试品溶于水后,配成每1mL含0.25mg的溶液,摇匀,即得。
注:“精密称量”是指称量应精确到所取重量的千分之一。“精密测量”是指测量体积的准确度应满足国家标准中体积移液器的准确度要求。
操作步骤:分别精确吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μL到液相色谱仪中,用紫外吸收检测器在276nm波长处测定胞磷胆碱钠的吸收值,计算其含量。
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