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三磷酸腺苷二钠含量测定

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  含量测定: 总核着酸取三磷酸腺苷二钠适量,精密称定,加0.1mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠35.8g,加水至1000ml,无水磷酸二氢钾13.6g,加水至1000ml。二液互调pH值至70)使溶解并制成每1ml中含20μg的溶液,照紫外-可见分光光度法测定,在259nm的波长处测定吸光度,按C10H14N5Na2O13P3的吸收系数(E 1%/1cm)为279计算。

  含量测定: 总核着酸取三磷酸腺苷二钠适量,精密称定,加0.1mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠35.8g,加水至1000ml,无水磷酸二氢钾13.6g,加水至1000ml。二液互调pH值至70)使溶解并制成每1ml中含20μg的溶液,照紫外-可见分光光度法测定,在259nm的波长处测定吸光度,按C10H14N5Na2O13P3的吸收系数(E 1%/1cm)为279计算。

  三磷酸腺苷二钠的重量比 照高效液相色谱法测定,色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.2mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠35.8g、磷酸二氯钾13.6g,加水900ml溶解。用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0.加入四丁基溴化铵1.6g,加水至100Oml,摇匀)-甲醇(95:5)为流动相;柱温为35℃,检测波长为259nm,理论板数按三磷酸腺苷二钠峰计算不低于1500.出峰次序依次为一磷酸腺苷纳、二磷酸腺苷二钠与三磷酸腺苷二钠,各色谱峰的分离度应符合要求。

  测定法取本品适量.精密称定,用流动相制成每1ml中含4mg的溶液.取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,按下式计算三磷酸腺苷二钠(T3)在总核着酸中的重量比,三磷酸腺苷二钠重量比=T3/0.671T1+0.855T2+T3+Tx式中 T1为一磷酸腺苷钠的峰面积,T2为二磷酸腺苷二钠的峰面积,T3为三磷酸腺苷二钠的峰面积,Tx为其他物质的峰面积,0.671为一磷酸腺苷钠与三磷酸腺苷二钢分子量的比值,0.855为二磷酸腺苷二钠与三磷酸腺苷二钠分子量的比值,三磷酸腺苷二钠含量按下式计算三磷酸腺苷二钠含量(%)= 总核苷酸×三磷酸腺苷二钠的重量比。

  贮藏: 密封,凉暗干燥处保存。